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笔迹鉴定，是指对人通过书写活动形成的字迹进行的鉴认、识别活动。人的书写习惯具有特定性和稳定性，并在笔迹中得到反映。通过对笔迹的检验，可判明文件中的笔迹由几个人所写，是否由某人所写，利用笔迹进行人身同一认定，证实文件的真伪。鉴定时要了解案件有关情况，明确鉴定要求，査验笔迹物证和笔迹样本；分析判断笔迹是否正常，有无伪装或由于其他原因引起的变化；选择能反映书写人书写习惯的稳定的和带有特殊意义的特征；对检材和样本中找出的特征进行比较，找出符合点和差异点；对符合点和差异点的形成原因综合评断;做出鉴定意见并制做鉴定书。
综合评断是对检材笔迹与样本笔迹的相同特征与不同特征的价值进行科学分析，确定两者符合点与差异点的总和及其性质，并进而做出静定结论。评断的方法，一般是从研究差一点开始。鉴定任何笔迹，都会出现一定的特征差异。评断差异点的要点，是要确定差异点的性质。其性质有本质差异和非本质差异两方面。非本质差异说明检材笔迹与样本笔迹不同特征数量与质量所占的比例较小，本质差异表明两者不同特征的数量、质量比例大。前者一般说明两者为不同人书写习惯体系的反映。
文件不仅种类繁多而且用途也非常广泛，它广泛的应用于人与人、个人与集体、集体与国家乃至国与国的交往中。正由于此，它常常被不法分子所利用，或常常与各种案件发生联系，从而成为文件检验的对象：文件物证。
笔迹检验的对象是案件中的各种笔迹物证。笔迹检验是在研究认识个人书写习惯的基础上，对两部分笔迹进行比较鉴别，以确定它们是否为一人所写的检验过程。通过笔迹检验可以证明：物证笔迹是否为某人所写；几起案件中的物证笔迹是否为一人所写；一份物证笔迹材料中的几个部分是一人所写还是多人所写。
文件物质材料主要包括制作文件的墨水、油墨、纸张、胶水、浆糊等。文件物质材料检验是运用一定的物理或化学技术手段，对文件物证的物质材料从结构、成分及其它特征上进行鉴别，以确定其种类牌号及来源出处；同时还可确定它与某嫌疑人占有的类似物质材料是否在种类上相同，为澄清嫌疑认定罪犯提供旁证。
对笔迹鉴定的申请由谁提出，应当根据具体案情的不同而分配。当原告所提供证据达到了证明借贷关系成立或证明了借条系被告所书，完成了举证责任时，被告如否认是其签字则由被告申请作笔迹鉴定；当原告本身不能完成证明责任时，则应当由原告自己申请作笔迹鉴定，从而完成自己的证明责任。只有在原告完成了借条是被告所签的举证责任后，被告抗辩时，举证责任才依法发生转移，由被告对抗辩事实进行举证，这是对“谁主张、谁举证”原则的正确理解。
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